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交叉配血技术的原理与方法

作者:冯贤东

广西壮族自治区防城港市东兴市妇幼保健院发布时间:2024-02-02 13:35:356254次浏览[发表证书]

交叉配血技术是一种重要的输血前检查方法,旨在确保受血者与供血者之间的血液安全。本文将详细介绍交叉配血技术的原理与方法。

1.交叉配血技术的原理

交叉配血技术的原理是基于红细胞抗原与血清抗体反应的检测。人类的红细胞表面存在多种抗原,不同个体之间的红细胞抗原存在差异。当不同个体的红细胞抗原与血清抗体不相匹配时,会发生抗原抗体反应,导致红细胞凝集或溶血。因此,通过检测红细胞抗原与血清抗体的反应,可以确定不同个体之间的血液是否相容,以避免输血不良反应的发生。

2.交叉配血的方法

目前临床上常用的交叉配血方法主要有三种:盐水介质交叉配血法,凝聚胺交叉配血法和微柱凝胶卡式交叉配血法。

1)盐水介质交叉配血法

红细胞上携带有ABO抗原,盐水法是利用生理盐水将红细胞制备成2%5%的盐水悬液与相应的抗体结合(A型红细胞遇到含有抗AB型血清)之后,就会产生肉眼可见的凝集或溶血。所以当受血者和供血者血液经混合并离心后,如有ABO不配合问题,就会很快显示出来,所以常称为立即离心配血试验。用来检测供血者红细胞(血清)与受血者血清(红细胞)之间的ABO相容性。

盐水法交叉配血简单、方便、快速,但不能检出不完全抗体引起的交叉配血不配合。而且盐水法对于操作人员的操作技能与专业判断能力有一定的要求。有一定几率会导致试验结果出现假阴性。

2)凝聚胺交叉配血法

凝聚胺是一种四胺聚合物,可中和红细胞上的负电荷,降低Zeta电位,缩短细胞间距离,形成一种可逆非特异性的红细胞凝集现象。当红细胞与血清在低离子介质中孵育时,抗体与红细胞相应抗原结合后,在聚凝胺的作用下出现肉眼可见的凝集,这种凝集同普通的凝集现象从外表上是不能区分的,再加入重悬液,重悬液中的负电荷与聚凝胺上的正电荷中和,普通的凝集现象消失,而真正的凝集不消失。

凝聚胺法具有操作简便、快速等优点,可在短时间内完成操作,符合临床急诊输血的要求。凝聚胺法能够释放出更多的正电荷和红细胞的负电荷产生一定的中和作用,使正常的红细胞之间产生不特定的凝集,可以迅速检测到血清中的IgM抗体和IgG抗体。此外,添加低离子介质缓冲液以及凝聚胺溶液离心以后,对标本具有一定的洗涤作用以及稀释作用,能够使结果更加清晰,不会受到血浆物质干扰。

3)微柱凝胶卡式交叉配血法

是结合血型血清学及凝胶排阻层析原理而制成的,即红细胞抗原与相应抗体结合后形成凝集红细胞,而未与相应抗体结合的红细胞不发生凝集。通过离心的作用可将凝集及未凝集红细胞在凝胶介质中进行筛选,凝集的红细胞在离心力的作用下不能通过凝胶间隙而浮于凝胶表面或分散在凝胶中,而未凝集的红细胞在离心力的作用下可以通过凝胶间隙沉于柱底。

微柱凝胶法能对微弱的抗原或抗体进行反应,大大提高了试验的特异性和敏感度,也便于自动化、标准化,重复性好,结果观察直观,稳定可保存。但孵育、离心时间较长,不适用于特别紧急的配血。因此,微柱凝胶法和盐水法,凝聚胺法三者结合使用,可同时保障检测时效和安全水平。

3.交叉配血技术的挑战与展望

尽管交叉配血技术在临床应用中取得了显著成果,但仍面临一些挑战。首先,对于有些不完全抗体引起的交叉配血不兼容性,现有方法难以检测。其次,紧急情况下,可靠、快速的交叉配血技术较为有限。此外,操作人员专业素质和经验对试验结果影响较大,容易出现假阴性。

未来发展方向:

1)研究新型交叉配血方法,提高检测灵敏度和可靠性,以应对不完全抗体引起的交叉配血不兼容性的检出。

2)开发自动化、标准化检测设备,降低操作难度和减少试验误差。

3)优化交叉配血试验流程,删除繁琐且不必要的步骤,提高检测效率,缩短紧急情况下的配血时间。

4)加强操作人员培训,用持证上岗和定期考核来提高专业素质,降低交叉配血试验的假阴性率。